京尼平抑制高糖诱导的大鼠心肌H9c2细胞氧化应激及凋亡损伤

目的:探讨京尼平 (genipin, GEN) 对高糖损伤的大鼠心肌H9c2细胞的抗氧化作用和抑制细胞凋亡的机制.方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞, 高浓度 (50 mmol/L) 葡萄糖处理H9c2细胞建立细胞损伤模型, 分为正常糖对照组 (NC组, 葡萄糖浓度为5.6 mmol/L) 、高糖损伤组 (HG组, 葡萄糖浓度为50 mmol/L) 、正常糖+京尼平组 (NC+GEN组) 和高糖+京尼平组 (HG+GEN组, 京尼平浓度为10μmol/L) .CCK-8法检测细胞活力;酶标法和WST-1法分别测定细胞内丙二醛 (MDA) 含量和超氧化物歧化酶 (SOD) 活性;微板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶 (LDH) 活性;荧光探针DCF检测细胞内活性氧簇 (ROS) 水平;ELISA法检测核小体片段的聚集值;线粒体膜电位检测试剂盒 (JC-1) 检测细胞内线粒体膜电位变化;利用Western blot法检测线粒体内抗氧化酶锰超氧化物歧化酶 (Mn-SOD) , 以及早期凋亡蛋白细胞色素C (Cyt C) 、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平.结果:与HG组比较, HG+GEN组细胞活力显著升高 (P <0.05) , 细胞内MDA的含量及细胞上清液中LDH的活性明显降低 (P <0.05) , 细胞内SOD活性升高 (P <0.05) , 细胞内线粒体膜电位明显升高 (P <0.05) , ROS水平降低 (P <0.05) , 核小体片段聚集程度显著降低 (P <0.05) .HG组线粒体内抗氧化酶Mn-SOD比NC组降低 (P <0.05) , 但线粒体内凋亡蛋白Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平比NC组显著升高 (P <0.05) , 而HG+GEN组与HG组相比, Mn-SOD升高 (P <0.05) , Cyt C、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平显著降低 (P <0.05) .结论:京尼平对高糖损伤的心肌H9c2细胞具有抗氧化保护作用和抑制细胞凋亡的作用.