不同细胞对柯萨奇病毒A组10型毒株的敏感性及滴度检测影响因素分析

目的 探讨不同细胞对柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)毒株的敏感性和滴度检测影响因素,为临床样品分离、病毒培养及保存使用提供基础数据.方法 10株已在非洲绿猴肾(African green monkey kidney,Vero)细胞分离并培养2代的CV-A10毒株,检测其在Vero细胞、人胚肺二倍体细胞(human embryonic lung diploid cell,KMB17)、人横纹肌肉瘤(human rhabdomyosarcoma,RD)细胞及人喉癌细胞(human laryngeal carcinoma cell,HeP 2)上的感染性滴度,并对毒株进行蚀斑纯化和冻融处理.结果 CV-A10毒株均能适应Vero细胞、KMB17细胞及RD细胞,不能适应HeP-2细胞.RD细胞上第1天即开始病变,第4天达到增值高峰,感染性滴度最高,达到7.75 lgCCID50/ml;KMB17细胞上病变最慢,第3天发生病变,第5天达到增值高峰,滴度为4.85 lgCCID50/ml.毒株在37℃放置3d感染性滴度明显下降,4℃放置3d,-30℃和-80℃放置30 d感染性滴度均无影响.结论 RD细胞是CV-A10毒株最敏感的细胞,HeP-2细胞不敏感.CV-A10毒株反复冻融次数不宜超过5次,保存温度越低越好并避免4℃和常温下长时间放置.