树鼩IgG纯化鉴定及其多克隆抗体制备和检测

目的:比较两种抗体纯化方法在分离纯化树鼩IgG抗体的应用,制备抗IgG的多克隆抗体及检测.方法:采用两种商品化IgG抗体纯化试剂盒分离树鼩血清IgG抗体,采用SDS-PAGE和蛋白定量测定提纯IgG.以树鼩IgG作为抗原,与等量弗氏完全佐剂(第一次)、弗氏不完全佐剂(第二次)混合皮下注射免疫兔,对分离血清进行多克隆抗体纯化及Western Blot检测及定量分析.结果:两种方法均能有效分离纯化树鼩IgG,在经过Montage PROSEP-A试剂纯化后的IgG在纯度和含量方面均优于ProteinA/G Matrix试剂.通过纯化后的树鼩IgG免疫兔制备的抗IgG抗体能有效识别树鼩IgG.结论:纯化的树鼩IgG具有良好免疫原性,由此制备的抗体具有高度特异性.研究结果为利用树鼩作为实验动物提供了必要的实验基础.