蛇床子素对TM3小鼠睾丸间质细胞增殖及雄激素合成与分泌的影响

Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica(2017)

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摘要
目的:研究蛇床子素对体外培养的睾丸间质细胞雄激素合成与分泌的影响.方法:以TM3小鼠睾丸间质细胞为实验对象,采用1 ~ 320μmol/L蛇床子素干预TM3细胞24h、48h和72h,以MTT检测细胞增殖;采用5~80μmol/L蛇床子素干预TM3细胞24h和48h,RT-qPCR技术检测雄激素合成酶相关基因mRNA表达;采用80 μmol/L蛇床子素干预TM3细胞15rain~ 12h,RT-qPCR技术检测即刻早期基因mRNA表达,并运用Western blot方法检测CYP17A1蛋白表达,ELISA方法检测细胞分泌液睾酮含量.结果:与对照组(Con)比较,160~320μmol/L蛇床子素作用48h和72 h均显著抑制TM3细胞增殖.不同浓度蛇床子素干预TM3细胞24h和48h后,与对照组比较,40μmol/L和80μmol/L蛇床子素显著促进类固醇急性调节蛋白(Star)基因表达;80 μmol/L蛇床子素显著促进胆固醇侧链裂解酶(Cypll a1)基因表达;大于20μmol/L蛇床子素显著增强细胞色素P45017α1羟化酶(Cyp17a1)基因表达、尤其是干预48h上调幅度更大,但是对CYP17A1蛋白表达无明显作用;也显著促进3β类固醇脱氢酶(Hsd3b2)基因表达;大于10μmol/L蛇床子素干预24h可显著促进黄体生成素受体(Lhr)基因表达.此外,80μmol/L蛇床子素干预12h可显著促进Star和Nr4a2基因表达,作用15min~1h即可显著增强Nr4a1基因表达.且蛇床子素可升高TM3细胞睾酮水平.结论:蛇床子素具有促进小鼠睾丸问质细胞雄激素合成与分泌的药理作用.
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