不同剂量氢化可的松诱发小鼠药源性脾肾虚证的评价研究

目的 评价氢化可的松诱发小鼠药源性脾肾虚证模型,并探索其物质基础.方法 80只ICR小鼠按随机分为对照组、极低、低、中、高剂量组,每组16只,分别采用灭菌水、0.33、0.66、3.3、12.5 mg/(kg·d)氢化可的松灌胃.每日动态观测小鼠体重,并分别在给药第7天和第14天,检测小鼠抓力、旷场活动度、躯体不同部位红外温度等表征信息.分别于给药第8天和第15天各处死小鼠8只,取脾脏、胸腺、心脏和肾脏称重并计算脏器指数;ELI SA检测血清皮质酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量;实时荧光定量PCR检测肾上腺StAR、Cyp 11 a1、Cyp21 a1、Cyp11 b1、Cyp11 b2 mRNA表达;Western Blot检测肾上腺LDLR、SRBI、StAR蛋白表达.结果 与对照组同期比较,低、中剂量组4～14天体重下降(P＜0.05),极低剂量组7天尾部最低温度、StAR、Cyp21 a1 mRNA表达,14天头部最高温度、躯干平均温度、尾部最低温度以及ACTH含量、LDLR、StAR蛋白表达下降(P ＜0.05,P＜0.01),14天抓力上升(P＜0.05);低、中、高剂量组7、14天头部最高温度、躯干平均温度、尾部最低温度、胸腺重量和指数下降(P ＜0.05,P＜0.01);低剂量组7、14天StARmRNA、LDLR、StAR表达下降(P ＜0.05,P＜0.01),14天CORT含量、ACTH、Cyp11a1、Cyp11b1 mRNA表达下降(P＜0.05,P＜0.01);中、高剂量组7、14天脾脏重量和指数、CORT含量、ACTH、StAR、Cyp21a1、Cyp11b1 mRNA、LDLR、SRBI、StAR表达下降(P ＜0.05,P＜0.01),14天Cyp1 1 a1、Cyp11b2 mRNA下降(P ＜0.05,P＜0.01);高剂量组14天体重、旷场活动度下降(P＜0.05).结论 采用0.66及3.3 mg/(kg·d)氢化可的松持续给药14天可建立稳定的药源性脾肾虚证小鼠模型,可能与其降低肾上腺皮质激素合成酶表达和垂体-肾上腺皮质轴功能有关.