铁皮石斛类受体激酶DoRLK的基因克隆和分子特征

目的 克隆铁皮石斛Dendrobium 0fficinale类受体激酶(receptor-like kinase,RLK)基因,命名为DoRLK(GenBank注册号 ANC68272.1).方法 采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)和 RACE技术获取基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用软件DNASTAR6.0和MEGA 7.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助定量PCR检测基因表达模式.结果 DoRLK基因cDNA全长1715bp,编码1条由423个氨基酸组成的多肽,相对分子质量 47800.88,等电点为9.47.DoRLK蛋白包含RLK蛋白家族的1个蛋白激酶结构域(85～370)和一个跨膜基序(250～270).DoRLK基因与多种植物 RLK基因相似性很高(43.62％～63.35％),与小兰屿蝴蝶兰、海枣、芦笋等植物亲缘关系较近.DoRLK基因具有组织表达特异性,其转录本在石斛根中表达量较高,分别为叶和茎中的2.22、2.75倍.结论 DoRLK基因的分子鉴定为进一步揭示RLK在铁皮石斛与环境互作中的功能奠定基础.