人源Plk1及其结构域蛋白的融合表达及纯化

Wei LI,Hui-Jie YU,Si-Nian WANG,Xuan LIU,Ping LI,Qi-Sheng JIANG,Cheng CAO

Letters in Biotechnology（2015）

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摘要

目的:表达纯化GST-Plk1及GST-Plk1 KD、GST-Plk1 PBD融合蛋白,以用于Plk1与其结合蛋白相互作用的研究.方法:PCR扩增Plk1全长及其KD、PBD结构域基因,定向克隆至pGEX-4T-1原核表达载体中,在大肠杆菌中分别表达其融合蛋白,并利用GSH交联的琼脂糖珠纯化.结果:人源Plk1及其结构域基因被克隆至pGEX-4T-1载体中;通过亲和纯化获得带有GST标签的Plk1及其结构域的融合蛋白.结论:构建了GST-Plk1、GST-Plk1 KD、GST-Plk1 PBD表达质粒并表达了相应的融合蛋白,为研究Plk1体外相互作用蛋白提供了基础.

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