核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量

目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法.方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较.结果 NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0％,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4％外,其余浓度均在1％～3％之间,不同浓度的样品回收率在97.2％ ～ 107％之间;化学法定量结果RSD在0.6％ ～7.9％之间,相对误差在3％～6.5％之间,不同浓度样品回收率在93.5％ ～ 105.3％之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320 ～ 410 mg/g之间.结论 1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量.