流感H3N2疫苗纳米乳佐剂的优化及安全性

目的 优化纳米乳新配方,并从载水量及载苗方式探讨影响佐剂效果的因素.方法 将ICR小鼠随机分为7组,每组5只,即A1、A2、A3、A4纳米乳佐剂组[A1(载水量66.7％)、A2(载水量80.0％)、A3(载水量85.7％)为成乳后加入疫苗吸附,A4(载水量80.0％)为成乳前加入疫苗包裹]:分别加入等量H3N2裂解疫苗[血凝素(hemagglutinin,HA)1.8μg];空白对照组:生理盐水;单独疫苗组:HA 1.8μg;铝佐剂组:Al(OH)30.2 mg,HA 1.8μg.均经小鼠大腿腓肠肌注射0.2ml,0、21 d免疫,于初免后第1周开始,每周经尾动脉采血,分离血清,检测血凝抑制(haemagglutination inhibition,HI)效价,比较各组的免疫应答水平.以初免后1周内小鼠体重变化及最大给药量试验分析纳米乳的最大耐受量(maximal tolerance dose,MTD).采用马尔文粒度仪检测不同载水量纳米乳粒径大小及分散系数.伪三元相图法及静置观察检测稳定性.结果 小鼠初免后第5周,单独疫苗组小鼠HI滴度与A1、A2、A3纳米乳佐剂组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),与A4纳米乳佐剂组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);A3纳米乳佐剂组于初免后第5周,HI滴度达到峰值,约为单独疫苗组的4倍,也明显高于铝佐剂对照组和A1、A2纳米乳佐剂组(P均＜0.05).纳米乳搭载或包裹疫苗对小鼠生长无明显影响,MTD＞ 25 ml/kg.纳米乳平均粒径分布均为10～100 nm左右,纳米乳A1、A2、A3粒径大小无明显差异,均匀度较好.载水范围大的纳米乳可搭载足量抗原,稳定性好.结论 载水量85.7％、以吸附方式载苗的纳米乳佐剂效果最佳,且具有良好的安全性.