RNA结合模体蛋白3对细胞总蛋白质合成的影响及其靶基因的鉴定

RNA结合模体蛋白3(RNA binding motif protein 3,RBM3)受低温应激产生,参与介导亚低温的神经保护功能,但其作用机制及其下游靶分子尚不清楚.本研究构建了人RBM3基因的重组表达质粒,运用一种新型的、非放射性方法即翻译表面感应(surface sensing of translation,SUNSET)来检测RBM3过表达对细胞总蛋白质合成(global protein synthesis,GPS)的影响.结果 显示,RBM3过表达使细胞总蛋白质的合成水平上调23.7％ (P＜0.001),这与RBM3过表达引发的真核翻译延伸因子2 (eukaryotic translation elongation factor 2,eEF2)及真核翻译起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)的活性增高相一致.对RBM3可能的下游靶基因内质网蛋白3(reticulon 3,RTN3),以及Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)的表达进行分析.结果 显示,RBM3使RTN3及YAP1在蛋白质水平的表达分别提高了51.7％ (P＜0.01)与43.3％(P＜0.01).与蛋白质水平变化相比,RBM3使YAP1在mRNA水平上调了2.0倍(P＜0.001),但对RTN3的mRNA表达未见显著影响.以上研究表明,SUnSET是一种稳定、可靠的细胞GPS的检测手段;RBM3可显著促进细胞GPS,且对其下游基因RTN3和YAP1存在靶向关系.本研究的结果为深入探讨RBM3的神经保护作用机制提供了理论基础.