骨髓来源间充质干细胞通过JAK-STAT信号通路抑制树突状细胞功能的体外研究

目的 探讨白介素-10(interleukin-10,IL-10)及其下游的JAK/STAT信号转导通路在骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对树突状细胞(dendritic cells,DCs)的免疫抑制机制中的作用.方法 SD大鼠骨髓来源的MSCs和DCs按1∶10比例共培养,在共培养体系中分别加入IL-10、IL-10中和抗体(neutralizing antibody,NA)和JAK抑制剂(AG490)干预.ELISA法检测培养细胞上清液IL-10和IL-12水平的变化;流式检测DCs表面分子标志物CD80、CD86、OX62及MHC-Ⅱ表达情况;Western blot检测(P-)JAK1,(P-)STAT3蛋白的表达情况.结果 成功在体外分离和培养MSCs和DCs并得到流式鉴定证实.MSCs与DCs培养后上清液分泌IL-10水平明显升高.MSCs处理后DCs没有典型的成熟DCs表面标志,CD80、CD86、MHC-Ⅱ及OX62的表达下降,IL-12分泌的水平也降低.实验中还发现外源性IL-10加到共培养板IL-10水平增加而IL-12水平减少,DCs的表面标志物表达下降,而加入IL-10NA与IL-10恰恰表现了相反的作用效果.加入JAK抑制剂(AG490)到共培养板后,IL-10分泌和(P-) JAK1和(P-) STAT3表达明显下降.结论 大鼠骨髓来源的MSCs能抑制DCs成熟和功能,可能是通过IL-10和JAK1/STAT3信号转导通路来发挥作用的.