猪流行性腹泻病毒S蛋白主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

[目的]建立一种快速、特异、敏感的检测血清中猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体的方法.[方法]利用生物学软件对PEDV S蛋白进行抗原位点分析,选择S蛋白的主要抗原表位区进行原核表达.采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.用纯化的重组蛋白作为包被抗原,经过条件优化、特异性和重复性试验,建立一种针对血清中PEDV抗体的间接ELISA检测方法.[结果]表达了重组S蛋白,重组的S蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性反应,并建立一种基于重组S蛋白的间接ELISA检测方法.组内及组间变异系数均小于10％,重复性较好.建立的间接ELISA检测方法分别与商品化PEDV抗体检测试剂盒和Western-blot鉴定结果相比,两者符合率分别为86.67％和88.89％.[结论]建立的间接ELISA方法可以用于PEDV抗体的检测.