谷丙转氨酶GPT2对急性髓系白血病细胞HL60生长特性的影响

目的:探讨参与三羧酸(TCA)循环中谷氨酰胺代谢的谷丙转氨酶2(glutamic pyruvate transaminase 2,GPT2)对急性髓系白血病细胞生长、增殖及凋亡的影响.方法:数据库挖掘了解不同血液肿瘤以急性白血病细胞中GPT2的表达水平,通过构建目的基因short-hairpin RNA (shRNA)慢病毒,转染急性髓系白血病细胞HL60后验证目的基因敲减效率.采用CCK-8法检测GPT2基因敲减对细胞增殖的影响;通过软琼脂集落形成实验检测基因敲减对细胞集落形成能力的影响;FACS(fluorescence activated cell sorting)检测基因敲减对细胞周期的影响;Caspase 3/7检测GPT2基因敲减对凋亡的影响.结果:GPT2在AML患者中存在mRNA水平高表达.CCK-8检测、软琼脂克隆形成实验以及Caspase 3/7检测结果表明,与shCtrl组比较,shGPT2-1、shGPT2-2、shGPT2-3组细胞增殖减缓,集落形成能力减弱,凋亡细胞数显著增加.细胞周期实验结果表明,GPT2基因与HL60细胞的周期分布显著相关.结论:GPT2在人AML细胞HL60中参与肿瘤细胞的增殖、周期分布以及细胞的凋亡.GPT基因的敲减会导致肿瘤细胞的增殖抑制以及凋亡增加.