SCAR-PCR技术鉴定日本血吸虫尾蚴性别的应用

采用日本血吸虫单条毛蚴感染单个阴性钉螺的方法,培育获得可释放单一性别尾蚴的阳性钉螺.收集每只阳性钉螺释放的单一性别尾蚴,用序列特异扩增区域PCR(SCAR-PCR)鉴定尾蚴性别;用同一钉螺逸出的单一性别尾蚴感染小鼠后21 d,剖杀小鼠,收集成虫,判定成虫的性别以验证尾蚴性别(实验动物感染法)并评价SCAR-PCR鉴定单条尾蚴性别的正确性.结果显示,仅雌性尾蚴能扩增出153 bp的特异性条带,其鉴定结果与实验动物感染法的判定结果一致.SCAR-PCR检测DNA下限为16.5 ng,相当于1条尾蚴DNA量.采集经动物实验确认的雄性和雌性尾蚴各40条,应用SCAR-PCR检测出其中37条雌性尾蚴和40条雄性尾蚴.SCAR-PCR检测单条雌性尾蚴的正确性为92.5％(37/40),检测单条雄性尾蚴的正确性为100％(40/40).应用SCAR-PCR可以鉴别日本血吸虫尾蚴的性别.