黏质沙雷菌磷脂酶A1辅助蛋白S对表达宿主菌大肠杆菌抑制作用机制

黏质沙雷菌plaS基因编码的磷脂酶A1辅助蛋白S(phospholipase A1 accessory protein S,PlaS)能够显著提高磷脂酶A1在大肠杆菌中的表达活性,但对宿主菌的生长具有抑制作用,且抑制机制尚无相关研究报道.本实验通过对PlaS进行生物信息学分析并对其N端截短系列表达菌株的生长特性进行研究以确定其抑制作用关键区域,并通过扫描电子显微镜观察和流式细胞仪检测来初步探究PlaS对表达宿主菌的抑制机理.结果表明,在PlaS N端分别截短前23、24、25、26、27个氨基酸构建的表达菌株中,dS23P28、dS24P28、dS25P28、dS26P28菌株仍表现出不同程度 的生长抑制现象,而dS27P28菌株没有出现生长抑制现象,初步表明PlaS N端的前27个氨基酸为抑制关键区域.扫描电子显微镜和流式细胞仪结果显示,PlaS的表达对大肠杆菌的细胞膜有严重的破坏作用,而N端截短前27个氨基酸的PlaS表达后对大肠杆菌细胞膜的损伤作用消失,这一结果也与生长特性结果一致.本实验结果可为深入研究黏质沙雷菌PlaS功能提供理论参考.