固相萃取-液相色谱-串联质谱法同时测定葛根中11种黄酮苷元的含量

建立了固相萃取-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定葛根中葛根素、甘草素、大豆素、野黄芩素、大豆黄素、槲皮素、鸢尾黄素、染料木素、山萘酚、黄芩素和刺芒柄花素11种黄酮苷元含量的方法.在0.10 g葛根样品中加入0.5 g叔丁基对苯二酚,36 mL 50％(体积分数)乙醇溶液和4 mL盐酸,在氮气保护下水解120 min,提取其中的11种黄酮苷元.采用Waters HLB固相萃取柱,以20％(体积分数)甲醇溶液为淋洗液,以甲醇为洗脱液对样品进行净化.以Mightysil RP-18色谱柱为固定相,以甲醇-水体系(大豆苷、大豆黄苷、刺芒柄花苷)或甲醇-0.15％(体积分数,下同)甲酸溶液体系(其他8种黄酮苷和11种黄酮苷元)为流动相进行梯度洗脱,采用LC-MS/MS测定其中11种黄酮苷元的含量.用体积比为4:6的甲醇-0.15％甲酸溶液的混合液配制的混合标准溶液系列绘制标准曲线,外标法定量.结果显示:11种黄酮苷元的质量分数在0.05％～2.50％内与其对应的峰面积呈线性关系,葛根素、大豆素和黄芩素的检出限(3S/N)均为0.04％,甘草素、野黄芩素、大豆黄素、槲皮素、鸢尾黄素、染料木素、山萘酚和刺芒柄花素的检出限均为0.02％;对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,11种黄酮苷元的回收率为75.0％～94.0％,测定值的相对标准偏差(RSD,n=6)为3.5％～12％;方法用于实际葛根样品的测定,葛根素、大豆素、大豆黄素、染料木素和刺芒柄花素均被不同程度地检出.