RPL15在K562细胞向红系分化过程中的功能和机制研究

目的 研究RPL15基因在K562细胞向红系诱导分化过程中的表达变化,并确定其对珠蛋白表达及红系分化的影响.方法 用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,采用实时荧光定量PCR(qPCR)及Western blot法检测RPL15在K562红系分化过程中的表达情况.利用RNA干扰(RNAi)技术抑制K562细胞中RPL15的表达,进而通过四甲基联苯胺染色、qPCR及流式细胞技术检测K562细胞中血红蛋白、红系分化相关基因以及CD235a和CD71表达的变化.结果 在K562细胞向红系分化过程中,RPL15的mRNA及蛋白水平均呈先升高后下降趋势.与对照组相比,干扰RPL15表达后,向红系分化24、48和72 h的K562细胞血红蛋白染色阳性率均明显下降;向红系分化的K562细胞中α-、β-、ε-、γ-珠蛋白及红系分化相关基因GATA1和HSP70相对表达量均明显下调(均P<0.05);而抑癌基因P53的mRNA表达水平显著上调(P<0.01).同时CD235a+CD71+K562细胞比例在RPL15干扰后显著降低(P<0.01).结论 抑制RPL15表达可抑制K562细胞向红系分化,提示RPL15正调控红系分化过程.同时P53相关通路、GATA1及HSP70可能参与了RPL15对红系分化的调控过程.