柴胡疏肝汤对颞叶癫痫小鼠的脑保护作用

目的 研究柴胡疏肝汤对颞叶癫痫小鼠海马区星形胶质细胞活化、星形细胞上调基因-1(AEG-1)mRNA表达、兴奋性氨基酸转运蛋白2(EAAT2)mRNA表达的影响,探究柴胡疏肝汤抗癫痫的可能机制.方法 将造模成功的慢性颞叶癫痫小鼠随机分为模型组(n=10),丙戊酸钠组(n=10),柴胡疏肝汤高剂量组(n=10),柴胡疏肝汤中剂量组(n=10),柴胡疏肝汤低剂量组(n=10),另取10只小鼠为对照组.丙戊酸钠组小鼠给予丙戊酸钠0.2 g·kg-1灌胃,柴胡疏肝汤高、中、低剂量组分别予柴胡疏肝汤60,30,15 g·kg-1灌胃,对照组与模型组小鼠给予等容积生理盐水灌胃,每天2次,连续干预28 d.同时进行行为学视频监测.用苏木素-伊红(HE)染色、尼氏染色观察小鼠脑组织海马区病变;以免疫荧光法检测小鼠脑组织星形胶质细胞活化情况;以酶联免疫吸附法检测小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)表达量的变化;以实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测海马组织AEG-1、EAAT2基因相对表达水平.结果 与对照组比较,模型组小鼠海马CA1、CA3区神经元细胞数量减少,排列紊乱,细胞肿胀破裂,胞浆内尼氏体数量减少,胞核边聚、固缩、核仁消失;海马区GFAP阳性细胞明显增多.对照组、模型组、丙戊酸钠组和柴胡疏肝汤高、中、低剂量组小鼠血清IL-1β浓度分别为(34.00±10.36),(62.18±9.55),(34.46±11.75),(24.37±3.65),(30.82±5.65),(29.09±3.47)pg·mL-1,与对照组比较,模型组血清IL-1β表达量和海马组织AEG-1 mRNA表达升高(P<0.05);而海马组织EAAT2 mRNA表达降低(P<0.05).与模型组比较,丙戊酸钠和柴胡疏肝汤高、中剂量组小鼠海马组织CA1和CA3区的病理改变明显改善,海马区GFAP阳性细胞明显减少,血清IL-1β表达量及海马组织AEG-1 mRNA表达降低(均P<0.05),而海马组织EAAT2 mRNA表达升高(P<0.05).结论 柴胡疏肝汤可以抑制星形胶质细胞活化,下调AEG-1 mRNA的表达,上调EAAT2 mRNA的表达,减少小鼠颞叶癫痫发作次数及缩短发作持续时间,改善海马CA1、CA3区的神经元损伤.