不同光源对Photofrin联合碘化钾抗大肠杆菌光动力效果的研究

目的 比较两种波长光源对光敏剂(Photofrin,PF)联合碘化钾(Potassium Iodide,KI)介导下的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)抗大肠杆菌(Eschenrichia coli,E.coli)效果.方法 检测PF吸收光谱后,以大肠杆菌标准株K-12(ATCC 33780)为实验对象,进行PDT处理.将实验分为PDT组(A组)和对照组(B组)后分别处理,A组处理分别为:(1)相同光剂量下两种波长对PF介导的aPDT抗菌能力;(2)相同光剂量下两种波长对PF联合KI介导的aPDT抗菌能力;(3)不同光剂量下,两种波长对相同浓度PF联合KI介导下的aPDT抗菌能力.其中PDT组分别将1μM、10μM与108菌落数(Colony forming units,CFU)/ml大肠杆菌各1 ml混匀,避光孵育30 min后,在光剂量10 J/cm2的蓝光或红光下进行光照;PF联合KI组,将终浓度为10 μM PF与108 CFU/ml大肠杆菌各 1ml混合,避光孵育30 min后添加1 ml KI(终浓度为100 mM),在蓝光或红光的不同光能量密度下进行光照.对照组分为3个小组,B1组:仅加入PF或仅加入PF+KI,不进行光照;B2组:不加入PF、KI,仅进行光照;B3组:空白对照组,仅加入菌悬液,不加入PF、KI也不进行光照.实验后的菌悬液经连续梯度稀释接种于培养基,孵育24 h后进行菌落计数.结果 PF在(366±15)nm波长范围内有高吸收峰,在415 nm蓝光处吸光度值较635 nm红光处高.不同浓度的PF在10 J/cm2的蓝光或红光作用下均无抗大肠杆菌作用(P＞0.05).PF联合100mMKI后,PF在10μM时具有抗菌作用,在能量密度10J/cm2的蓝光或红光作用下大肠杆菌存活率分别为0.00003865％、28.7％,在该条件下蓝光抗大肠杆菌作用强于红光(P＜0.001).在10 μMPF联合100 mM KI条件下,0 J/cm2的蓝光或红光与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);在0.5 J/cm2的蓝光作用下大肠杆菌存活率为0.0001209％,在20 J/cm2的红光作用下其存活率为0.00002783％.结论 PF联合KI,调节照射光的能量密度,可增强蓝光或红光对光敏剂PF介导下光动力抗大肠杆菌效果.