基于自噬途径探究白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞凋亡情况的影响

目的 探讨白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞自噬和凋亡的调节作用,为临床治疗结肠癌提供新的途径.方法 将结肠癌SW480细胞完全培养后接种于6孔板,设置对照组与低、中、高剂量组,分别加入含有0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的白花蛇舌草乙醇提取物进行干预.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率(IR);DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;AO染色观察细胞自噬的情况;Western blot法检测相关蛋白表达.结果 低、中、高剂量组24 h、48 h、72 h后IR水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着作用时间的延长和浓度的提高,白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用越明显,在24 h、48 h、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(35.78±2.52)μg/ml、(24.59±2.74)μg/ml和(18.54±2.12)μg/ml.低、中、高剂量组细胞凋亡率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),随着浓度的提高,白花蛇舌草乙醇提取物促进结肠癌SW480细胞凋亡的作用越明显.低、中、高剂量组细胞内发出红色荧光的酸性自噬囊泡的比重明显高于对照组.与对照组比较,低、中、高剂量组细胞干预72 h后自噬相关蛋白Beclin-1、BNIP3、Atg 5表达均明显增加,p62表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞增殖抑制作用显著,其机制可能与诱导细胞自噬和凋亡,共同促进细胞死亡有关.