四川地区猪源艰难梭菌分子分型调查

[背景]艰难梭菌是一种重要的人畜共患肠道病原菌,可引起人和多种动物抗生素相关性腹泻或假膜性肠炎.四川作为我国主要的生猪产区,还未有猪源艰难梭菌流行病学调查的相关报道,对猪源艰难梭菌的防控及保障猪肉安全带来挑战.[目的]调查四川地区猪源艰难梭菌的感染、流行情况,并对分离出的艰难梭菌进行分子分型研究.[方法]收集来自四川生猪主要产区6个养殖场中猪的粪便标本(n=110),采用厌氧培养技术在艰难梭菌鉴别培养基上进行分离培养;采用PCR方法扩增艰难梭菌4个毒素基因(tcdA、tcdB、cdtA、cdtB)和7个管家基因(adk、atpA、dxr、glyA、recA、sodA、tpi),对分离株进行毒素基因分型和多位点序列分型.[结果]从110份样品中,经革兰氏染色镜检及PCR鉴定,共分离出20株艰难梭菌,分离率高达18.18％;毒素基因分型结果显示共获得3种毒素基因型,包括 tcdA+tcdB+cdtA/cdtB+(n=3)、tcdA+tcdB+cdtA/cdtB-(n=6)、tcdA-tcdB-cdtA/cdtB(n=11);多位点序列分型结果显示获得5个ST型,包括ST11(n=3)、ST3(n=1)、ST35(n=2)、ST36(n=4)、ST109(n=10);进化树结果显示,所有分离株聚集为2个大群,分别为3个分支和17个分支.[结论]四川主要生猪产区猪群存在艰难梭菌感染,分离株的分子分型呈多样性,主要流行型为ST11、ST3、ST35、ST36、ST109型,并且存在ST11型高毒力菌株流行的风险.