阿尔茨海默病中高表达的miR-182-5p靶向抑制了Neuritin的表达

目的 筛选阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)数据集中可能靶向Neuritin的目标miRNA,明确二者在AD动物模型中的相关性,进一步探讨目标miRNA对Neuritin的靶向抑制作用.方法 从AD小鼠脑组织miRNA数据集中,富集AD中上调的miRNA;同时利用生物信息学手段,分析预测靶向Neuritin的miRNA;二者取交集,筛选获得AD中上调的可能靶向Neuritin的目标miRNA.为了明确二者的相关性,我们在AD模型小鼠中,使用qRT-PCR检测目标miRNA在脑组织的表达水平,同时利用Western Blot检测Neuritin蛋白在脑组织的表达.然后,在细胞水平观察了目标miRNA模拟物对Neuritin表达的影响.最后,我们用荧光素酶报告基因实验探讨了目标miRNA对Neuritn 3'UTR区特异性的结合作用.结果 筛选获得AD中上调、且可能靶向Neuritin的目标miRNA——miR-182-5p;在AD模型小鼠海马组织中,miR-182-5p的表达升高(P＜0.05),且Neuritin的表达降低(P＜0.01),说明AD模型小鼠海马中miR-182-5p与Neuritin的表达呈负相关;miR-182-5p模拟物转染293T细胞后,Neuritin表达低于对照组(P＜0.05),说明miR-182-5p抑制了Neuritin的表达;荧光素酶报告基因结果显示,共转染荧光素酶报告基因和 miR-182-5p 模拟物后,pLUC-Neuritin 组的荧光活性低于 pLUC-MUT-Neuritin 组(P＜0.01),说明 miR-182-5p通过与Neuritn 3'UTR区特异结合,靶向抑制了Neuritin的表达.结论 AD模型小鼠中miR-182-5p表达升高,miR-182-5p可以靶向抑制Neuritin的表达.