NAIF1对胃癌细胞中IFIT家族蛋白的影响

目的 探讨核诱导凋亡因子NAIF1在胃癌细胞系MKN45中的功能.方法 构建带有Tet-on系统的质粒pLVX-Tight-Flag-NAIF1-puro,在胃癌细胞系MKN45中,加入四环素衍生物强力霉素(Dox)诱导NAIF1表达,分别在加入Dox之后0、6、12、24 h收取细胞进行基因表达谱芯片检测,对差异表达的基因进行生物学分析,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot技术验证筛选的目的差异基因在mRNA和蛋白水平上的变化.结果 基因芯片测定结果显示干扰素诱导蛋白(IFIT)家族基因分子IFIT1、IFIT2和IFIT3在第24 h表达量明显增加,qRT-PCR同样表现出该变化,Western blot在蛋白水平进一步验证了该变化.IFIT家族另一成员IFIT5在mRNA和蛋白水平表达量的变化趋势并不明显.结论 胃癌细胞中过表达NAIF1能够促进免疫系统相关的部分干扰素诱导蛋白(IFIT)家族蛋白的表达.