间充质干细胞外泌体对海马神经元氧化应激的调控作用

Stroke and Nervous Diseases(2022)

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摘要
目的 探讨间充质干细胞外泌体(Mesenchymal stem cell derived-exosomes,MSC-Exo)对海马神经元氧化应激的作用.方法 首先体外培养原代小鼠海马神经元,用H2 O2刺激建立氧化应激模型,细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8,CCK8)筛选最佳H2 O2水平并检测不同水平MSC-Exo对细胞活力的作用,试剂盒检测超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性,酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immu-nosorbent assay,ELISA)检测DNA氧化损伤分子8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 deoxyguanosine,8-OHdG)的表达水平,然后免疫荧光和免疫印迹检测应激和损伤分子一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、高迁移率族蛋白B1(High mobility group box 1,HMGB1)的表达水平.结果 CCK8细胞活力实验显示,10μg/mL及以上水平的MSC-Exo对海马神经元氧化损伤具有明显的保护作用;与对照组比较,H2 O2组SOD的活性显著下降,而在MSC-Exo+H2 O2组有所提高,趋于正常;与对照组比较,H2 O2作用后iNOS,HMGB1,8-OHdG等分子的表达水平显著上调(P<0.01),MSC-Exo作用于模型后与H2O2组比较,这些分子的表达水平显著下调(P<0.01).结论 M SC-Exo作用于H2 O2诱导的海马神经元氧化应激模型后能够增加SOD的活性,抑制海马神经元iNOS,HMGB1,8-OHdG等分子的表达,表明MSC-Exo对海马神经元氧化应激有一定的调控作用.
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