抑制GRK2异常转膜控制JAK1-STAT1信号转导减少CIA小鼠树突状细胞的成熟

目的 G蛋白偶联受体激酶2 (G protein-coupled re-ceptor kinase 2,GRK2)异常活化和JAK1-STAT1 信号转导异常参与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的免疫异常反应,但两者关系不清.该文研究了GRK2对胶原性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠树突状细胞(dendritic cells,DCs)JAK1-STAT1 信号通路的作用和机制,为揭示RA的新机制提供依据.方法 建立CIA模型,流式细胞术检测DCs共刺激分子水平,ELISA检测小鼠血浆细胞因子水平,免疫组化法检测脾脏组织中p-JAK1 、p-STAT1 、GRK2 的表达.体外用骨髓细胞诱导成 DCs,IFN-α和 PGE2 刺激48 h.流式细胞术检测 DCs 共刺激分子水平和吞噬能力, ELISA检测细胞上清中细胞因子水平.CO-IP 法检测 DCs中 GRK2 和 JAK1 共定位. Western blot 法检测 JAK1 、STAT1 、胞膜GRK2表达.成像流式细胞术检测p-STAT1 入核率.结果 CIA小鼠中DCs共刺激分子水平升高,脾脏中GRK2与p-JAK1 、p-STAT1 的表达呈正相关,且CIA组脾脏中GRK2与JAK1 共定位明显下降.体外实验表明,GRK2抑制剂降低 DCs 共刺激分子表达、IL-6 和 TNF-α水平, JAK1 、STAT1 表达、GRK2胞膜表达、p-STAT1 入核,增加DCs吞噬功能及GRK2 与JAK1 的共定位.结论 DCs中GRK2转膜异常,介导了DCs的成熟和JAK1-STAT1 信号通路活化,抑制GRK2转膜可恢复其对DCs的JAK1-STAT1 信号转导的控制,减少DCs的成熟,在改善小鼠CIA中发挥重要作用.