UPLC-MS/MS法同时测定绞股蓝中16个皂苷类成分的含量

目的:建立超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS),在12 min内完成对绞股蓝药材中16个皂苷类成分(人参皂苷CK、F2、Rb1、Rb3、Rd、Rg2、Rg3、Rg5、Rg6、Rh4、Rh8,绞股蓝皂苷A、XLVI、XLIX,三七皂苷Fd和越南人参皂苷R8)的含量测定.方法:采用UPLC-MS/MS法,正离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定.色谱条件:采用Waters CORTECS C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6 μm),流动相为0.1％甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.25 mL·min-1,柱温为45℃.结果:在所设定的色谱条件下,12 min内完成对绞股蓝药材中上述16个成分的含量测定,在考察的浓度范围内均呈良好的线性关系(r＞0.997 6),回收率和RSD分别在96.2％～104.0％和1.5％～2.9％,精密度、重复性、稳定性考察均符合分析要求.含量测定结果发现,16个皂苷中,绞股蓝皂苷XLVI、A、XLIX和人参皂苷Rb3含量较高,含量均值分别达到7.083、5.599、1.657、1.283 mg·g-1,且不同产地的绞股蓝药材中皂苷类成分存在较大差异,聚类分析可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3类.统计发现,越南人参皂苷R8,人参皂苷Rb1、Rb3、Rd、Rg3、Rg5、Rg6、Rh8、F2、CK,绞股蓝皂苷XLVI和三七皂苷Fd成分含量在类型Ⅱ中高于类型Ⅰ和Ⅲ,而绞股蓝皂苷A与XLIX成分含量在Ⅲ类型中高于类型Ⅰ和Ⅱ.结论:本研究所建立的在12 min内完成对绞股蓝中16个皂苷类成分的UPLC-MS/MS定量分析方法简便、快捷、准确,分离效果较好,可为完善绞股蓝中皂苷类成分的质量标准评价提供依据.