嵌合OVA多肽的水貂肠炎病毒VP2病毒样颗粒的表达及鉴定

为探究水貂肠炎病毒(MEV)VP2病毒样颗粒(VLPs)作为嵌合载体携带外源抗原的能力,通过PCR技术将鸡卵清蛋白(OVA)第257～264位氨基酸短肽(SIINFEKL)插入到MEV VP2的N末端获得OVA257-264-VP2,通过克隆重组和蓝白斑筛选分别获得重组质粒Bacmid-VP2、Bacmid-OVA257-264-VP2,转染到昆虫细胞表达获得VP2、OVA257-264-VP2蛋白的重组杆状病毒;通过间接免疫荧光和Western-blot分析蛋白反应原性,透射电镜观察VLPs形态,血凝试验检测其血凝特性.间接免疫荧光和Western-blot结果表明,重组蛋白VP2和OVA257-264-VP2都具有良好的反应原性.透射电镜观察结果表明,VP2与OVA257-264-VP2都可以形成病毒样粒子,颗粒直径均约为22 nm.血凝试验结果表明,重组蛋白VP2和OVA257-264-VP2与天然病毒的凝集特性相同,均可达到1 ∶ 16 384.结论:在MEV VP2的N端插入OVA257-264,不影响VP2病毒样颗粒的组装,VP2和外源多肽都保持有良好的反应原性,MEVVP2可以作为疫苗载体递呈外源抗原.