肺腺癌细胞对RAW264.7巨噬细胞分化的影响

[目的]体外探究Lewis肺腺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞培养上清液对小鼠RAW264.7巨噬细胞极化的影响及其可能机制.[方法]RAW264.7细胞按如下分组:空白对照组、IL-4处理组、LLC细胞培养上清液条件培养基(LLC-CM)培养组和TC-1细胞培养上清液条件培养基(TC-1-CM)培养组.各组培养48h后收集上清液和细胞,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测空白对照组、IL-4组、LLC-CM组和TC-1-CM组巨噬细胞及LLC细胞和TC-1细胞培养上清液中补体C1q的含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测巨噬细胞CD68、CD80、CD206、Arg-1、IL-10 和 IL-27 mRNA,Western blot 检测 CD68、CD80、CD206、Arg-1、JAK2、p-JAK2、STAT5和p-STAT5的表达.[结果]巨噬细胞经IL-4处理后,上清液中补体C1q含量较空白对照组升高(P＜0.001);与空白对照组及IL-4处理组相比,LLC-CM组巨噬细胞培养上清液中补体C1q含量明显升高(P均＜0.001).与空白对照组相比,LLC-CM组巨噬细胞CD80表达明显降低(P＜0.001),CD206、Arg-1、IL-10和IL-27表达明显升高(P均＜0.001),p-JAK2、p-STAT5(P均＜0.001)含量降低.此外,LLC-CM 组巨噬细胞 p-JAK2、p-STAT5 表达量低于IL-4处理组(P均＜0.001).[结论]LLC细胞培养上清液可以通过抑制RAW264.7细胞JAK2/STAT5通路诱导其发生M2型极化并促进补体C1q高表达,高水平补体C1q可能参与促进RAW264.7细胞的M2型极化.