色素上皮衍生因子对视网膜X射线损伤的保护作用

本文通过体内外实验研究了色素上皮衍生因子(Pigment epithelium-derived factor,PEDF)对X射线引起视网膜损伤的保护作用.通过PEDF受体抑制剂处理和siRNA转染人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19来抑制PEDF功能,逆转录荧光定量PCR与ELISA测定siRNA降低PEDF表达的效果,CCK-8实验测定X射线照射后细胞活力的变化,采用小动物放射治疗模拟定位机设左右两野对穿照射小鼠眼部,每野照射10 Gy X射线,总剂量为20 Gy,配制含2 nmol/L PEDF-34(PEDF第44～77位的34个氨基酸片段)的生理盐水溶液,照射后每天滴眼处理小鼠,连续4周,照射8周后取眼球进行苏木素伊红(HE)染色与TUNEL染色,观察视网膜病变和细胞凋亡情况.体外实验表明,预处理PEDF受体抑制剂和降低PEDF表达可增强X射线对ARPE-19细胞的损伤作用,PEDF-34对X射线引起的ARPE-19细胞损伤具有保护作用.小鼠实验表明,20 Gy X射线照射后8周视网膜色素上皮细胞层出现结构异常,外核层含有凋亡细胞,PEDF-34处理组保持了视网膜的正常结构且并无凋亡细胞.本研究提示:PEDF在X射线引起的视网膜辐射损伤中具有保护效果,PEDF-34滴眼可缓解视网膜X射线损伤,为研究防治放射性视网膜病变的新方法提供了实验依据.