牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的保守基因序列设计了特异性的引物和探针,建立了荧光定量PCR检测方法.对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并用田间临床样品对该方法和OIE推荐的普通PCR进行了验证.结果显示,本研究建立的荧光定量PCR与绵羊痘病毒(SPPV)、山羊痘病毒(GTPV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和羊口疮病毒(ORFV)均无交叉反应;重组质粒标准品的检测限为1.16×100 copies/μL;组间和组内的变异系数均≤2.00％.25份田间临床样品检测结果显示,本研究建立的荧光定量PCR阳性检出率为100％,而OIE推荐的普通PCR方法的阳性检出率为55.6％.上述结果表明,本研究建立的LSDV荧光PCR特异性强、敏感性高、重复性好,为牛结节性皮肤病的监测和防控提供了有效的技术手段.