棉铃虫正性调节区锌指类似蛋白10基因的克隆及表达分析

棉铃虫(Helicoverpa armigera)是一种杂食性害虫,可对多种农作物产量造成严重损失.目前Bt作物的大面积种植和化学农药的大量使用使得棉铃虫进化出应对杀虫剂和植物次生物质而保护自身的防御机制.为了开发绿色杀虫剂,对棉铃虫进行无害化防控,本研究以棉铃虫细胞色素P450(cytochrome P450 proteins,CYP)CYP6B6启动子上响应2-十三烷酮(2-Tridecanone,2-TD)的核心序列HE1做探针,利用DNA pull down技术筛选出1个棉铃虫正性调节区锌指类似蛋白10(positive regulatory domain zinc finger protein 10 like,PRDM10l)基因.对该基因进行克隆、生信分析和融合蛋白的原核表达,同时利用qPCR检测其时空表达谱及2-TD胁迫下该基因在6龄棉铃虫中肠中的表达规律.结果显示,HaPRDM10l(GenBank No.XM_021334552.1)的ORF为2067 bp,编码688个氨基酸,蛋白分子质量和理论等电点分别为77.96 kD和8.84.HaPRDM10l在棉铃虫的不同发育阶段均有表达,在5龄幼虫中表达量最高;在6龄幼虫不同组织中,中肠表达量最高.不同浓度的2-TD处理后,HaPRDM10l和CYP6B6均能响应2-TD的诱导.HaPRDM10l在10 mg/g的2-TD处理12 h时表达量达到最大值,为对照组的7.6倍;CYP6B6在5 mg/g的2-TD处理6 h后表达量达到最大值,为对照组的4.6倍.相关性分析显示在6 h处理组中HaPRDM10l和CYP6B6的表达呈正相关(r=0.749,P<0.01).上述结果表明HaPRDM10l可能调控CYP6B6的表达以应对2-TD的胁迫.本研究为明晰棉铃虫应对植物次生物质的胁迫机制提供参考.