华支睾吸虫不同发育阶段miRNA表达谱分析

目的 检测华支睾吸虫不同发育阶段微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱,分析其生物学特征,探索其在华支睾吸虫发育过程中的潜在作用.方法 使用高通量测序技术系统分析华支睾吸虫虫卵、囊蚴和成虫3个不同发育阶段miRNA的表达情况,鉴定阶段特异性的miRNA,并经RT-qPCR对测序结果进行分析和验证.结果 本研究在成虫中总共鉴定出53个已知miRNAs,虫卵55个已知miRNAs,囊蚴53个已知miRNAs,其中在3个阶段中均表达的已知miRNAs有52个,只有1个已知miRNA(new_miR-006)仅在虫卵中表达.成虫、虫卵、囊蚴3个阶段分别预测出99、92、108个新miRNAs,其中在3个阶段均表达的新miRNAs有66个.成虫,虫卵、囊蚴3个阶段特异性表达的miR-NAs分别是7、10、26个.随机选择10个miRNAs进行RT-qPCR验证,均与测序结果相一致.结论 华支睾吸虫成虫、虫卵和囊蚴miRNA表达谱不同,均存在期特异性表达的miRNAs,这些miRNAs可能在华支睾吸虫的不同发育阶段发挥调节作用.