利多卡因对糖尿病大鼠脊髓神经元的损伤作用

目的 探讨利多卡因对糖尿病大鼠脊髓神经元的损伤作用.方法 选择健康SPF级雄性SD大鼠30只、GK大鼠30只,12周龄,体重180～200 g.取大鼠脊髓神经元进行体外分离培养.采用随机数字表法将大鼠脊髓神经元分为四组:SD大鼠脊髓神经元组(C组)、SD大鼠脊髓神经元+利多卡因组(CL组)、GK大鼠脊髓神经元组(GK组)和GK大鼠脊髓神经元+利多卡因组(GKL组).C组和GK组置于DMEM高糖培养基中,在37℃,5％CO2培养箱内培养24 h,CL组和GKL组在相同条件下加入浓度为2 mmol/L的利多卡因培养24 h.采用Western blot法检测脊髓神经元中自噬相关蛋白PINK1、mTORC1、AMPK、p?AMPK、LC3Ⅱ和LC3Ⅰ含量,DCFH?DA法检测脊髓神经元中活性氧(ROS)含量,免疫荧光法检测脊髓神经元中PINK1和LC3含量.结果 与C组比较,CL组、GK组和GKL组脊髓神经元PINK1、LC3含量和p?AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),mTORC1含量明显降低(P<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05).与GK组比较,GKL组脊髓神经元PINK1、LC3含量和p?AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ比值明显升高(P<0.05),mTORC1含量明显降低(P<0.05),ROS含量明显升高(P<0.05).结论 利多卡因诱导GK大鼠脊髓神经元的自噬相关蛋白的表达及ROS的释放,加重对GK大鼠脊髓神经元的损伤.