空心莲子草醇提物抗AIV-H9N2作用的研究

为 了研究空心莲子草醇提物[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb.alcohol extract,AAE]的体外抗H9N2型禽流感病毒(avian Influenza virus,AIV)的效果,探索空心莲子草体外抗病毒的作用方式,试验测定了 AIV-H9N2对DF-1细胞的TCID50;采用观察细胞病变联合CCK-8检测的方法,测定AAE对DF-1细胞的毒性作用;通过计算各试验组(空白对照组、病毒对照组、给药组)细胞的存活率,观察3种作用方式(预防感染作用、抑制复制作用及直接杀灭病毒作用)下,不同浓度AAE体外抗AIV-H9N2的效果,并计算治疗指数(TI).经尿囊腔接种病毒,测定鸡胚的半数胚致死量(ELD50),测定AAE对鸡胚的最大安全浓度,然后对鸡胚进行攻毒用药试验,统计各组存活情况及血凝效价,观察胚体的发育情况.结果表明:收获的AIV-H9N2病毒液TCID50为1×10-4 23/0.1 mL;AAE对DF-1细胞作用 24,48 小时时的 CC50 浓度分别为(191.52±8.73)μg/mL、(156.96±8.79)μg/mL;3 种作用方式下,药物对细胞的保护率范围分别在40％～58％、4％～34％及12％～18％之间,AAE治疗指数预防病毒感染作用(3.42±0.71)大于影响病毒复制作用(1.74±0.11),AAE不具有直接杀灭病毒作用.鸡胚的ELD50为1×10-2 84/0.2 mL,AAE对鸡胚的最大安全浓度为32.5 mg/mL,AAE能显著改善AIV-H9N2感染胚胎的存活情况(P＜0.05),降低病毒感染的血凝效价,减弱病毒对胚体发育的影响.说明AAE在DF-1细胞和鸡胚中对AIV-H9N2具有潜在的抑制作用,可以抑制AIV-H9N2的活性.