H3N2流感病毒HA保守Th表位对CD4+T细胞活化及分化的影响

目的 探讨H3 N2病毒HA保守Th表位对CD4+T细胞活化及分化的影响,为后续研究通用流感疫苗奠定基础.方法 利用NetMHCⅡpan-4.0软件预测H3N2疫苗株A/Kansas/14/2017 HA的Th表位,以IC50<500 nM为标准筛选阳性预测表位;采用SWISS-MODLE对A/Kansas/14/2017 HA进行同源建模,在3D模型上定位保守Th表位,根据表位的亲和力、保守性及核心序列的位置筛选高保守表位;合成6个非重叠的高保守Th表位,用保守Th表位体外刺激健康人外周血单核细胞,流式细胞术分析CD4+T细胞表面分子CD69及细胞因子IFN-γ、IL-4的表达.结果 在A/Kansas/14/2017 HA中共筛选到48个阳性预测Th表位,其中33个在H3-HA中是保守的;成功构建A/Kansas/14/2017 HA 3D模型,27个保守Th表位位于HA头部,其余6个位于杆部;人外周血PBMC经保守Th表位刺激后,CD69分子表达增加,细胞因子IFN-γ和IL-4合成增加.结论 筛选到的6个H3 N2 HA高保守Th表位具有免疫原性,可刺激CD4+T细胞活化及分化.