ZXDC基因敲减对脊髓神经元氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨转录因子ZXDC基因敲减对脊髓神经元(SCNs)氧化应激损伤后的保护作用及机制.方法 应用不同浓度H2O2诱导SCNs氧化应激损伤,CCK8检测细胞活性筛选H2O2诱导最佳浓度;实验细胞分为:Control组、H2O2+AAV-NC组和H2O2+AAV-ZXDC siRNA组,免疫荧光染色鉴定原代SCNs,检测各组ZXDC表达和神经突起平均长度;Western bolt检测各组细胞中ZXDC、CCL2、CCR2表达,qRT-PCR检测细胞中炎症因子TNF-α和IL-1β mRNA表达,应用EdU荧光染色、CCK8检测ZXDC对SCNs增殖和活性的影响.结果 筛选600μmol/L H2O2适用于SCNs氧化应激模型制备.β-Ⅲ-tubulin免疫荧光染色鉴定原代SCNs培养成功;与Control组比较,H2O2+AAV-NC组神经突起平均长度显著降低,ZXDC、CCL2和CCR2表达显著增高,而H2O2+AAV-ZXDC siRNA组较H2O2+AAV-NC组神经突起平均长度显著增高,ZXDC、CCL2和CCR2蛋白表达显著降低(P＜0.05);与Control组比较,H2O2诱导组TNF-α和IL-1β mRNA相对表达显著增高,细胞增殖和细胞活力显著降低.与H2O2+AAV-NC组比较,H2O2+AAV-ZXDC siRNA组TNF-α和IL-1β mRNA相对表达显著降低,细胞增殖和细胞活力显著增高(P＜0.05).结论 ZXDC基因敲减通过调控CCL2/CCR2信号通路促进氧化应激损伤SCNs细胞增殖、细胞活力和神经突生长.