朝医鹿茸大补汤对咳嗽变异性哮喘豚鼠TLR4/WNT-5A信号通路的影响

目的 探讨鹿茸大补汤对咳嗽变异性哮喘的作用机制.方法 将豚鼠随机分为正常组(CON)、模型组(OVA)、鹿茸大补汤高剂量组(HIGH)、鹿茸大补汤低剂量组(LOW)、地塞米松组(DEX).通过烟熏加注射卵清蛋白(OVA)、氢氧化铝溶液及雾化吸入激发咳嗽来创建咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)模型.最后一次刺激豚鼠后24 h内解剖,取其肺泡灌洗液(BALF)和肺组织.利用免疫吸附(ELISA)法测定BALF中炎症细胞种类和炎性细胞因子的含量;取左肺中叶,进行HE染色和Masson染色,观察病理变化;用免疫组织化学染色法观察肺部组织中TLR4和WNT-5 A蛋白的表达分布;从左肺上叶提取蛋白做免疫蛋白印迹(Western blot),测肺组织中TLR4、WNT-5 A蛋白水平;用免疫荧光法检测肺组织中TLR4、WNT-5 A荧光强度;采用流式细胞术在豚鼠肺组织中检测IL-4和IFN-γ.结果 鹿茸大补汤能够改善豚鼠气道炎症反应,抑制胶原纤维沉积,降低BALF中IL-4、IL-5、IL-13含量,抑制肺组织中TLR4、WNMT-5 A的蛋白表达,升高肺组织中的IFN-γ水平,同时降低IL-4水平.结论 鹿茸大补汤可能通过TLR4/WNT-5 A信号通路抑制CVA的发生.