SIRT1-TLR4信号通路在MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应中的作用

目的 探索SIRT1-TLR4信号通路在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶盐酸盐(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森病(PD)小鼠模型炎症反应中的作用.方法 选用MPTP处理C57BL/6小鼠构建帕金森病小鼠模型,将小鼠随机分为对照组(Con组)、模型组(MPTP组)、激活剂组(RV+MPTP组)、抑制剂组(EX527+RV+MPTP组).腹腔注射MPTP建立帕金森病小鼠模型,并给予白藜芦醇(RV)灌胃、SIRT1特异性抑制剂EX527腹腔注射处理,通过爬杆实验、旷场实验评估小鼠行为学改变,利用免疫荧光、Western blot等检测酪氨酸羟化酶(TH)、SIRT1、TLR4、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等相关蛋白表达.结果 和Con组相比,MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显增加,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显减少(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显缩短,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显增加(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠爬杆总时间和爬杆转向时间明显增加,行走总路程、进入中心区域总距离、进入中心区域次数均明显减少(P<0.05).免疫荧光检测发现,和Con组相比,MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显减少,TLR4表达明显增加(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显增加,TLR4表达明显减少(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠脑黑质区TH阳性神经元和SIRT1蛋白表达均明显降低,TLR4表达明显增加(P<0.05).蛋白质印迹检测发现,和Con组相比,MPTP组小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显降低,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05);和MPTP组相比,RV+MPTP组小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显升高,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显降低(P<0.05);和RV+MPTP组相比,EX527+RV+MPTP组小鼠小鼠脑黑质中TH、SIRT1蛋白表达明显降低,TLR4、IL-6、TNF-α蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 SIRT1-TLR4信号通路可能参与PD神经炎症反应过程,可能在PD的发生、发展中有重要作用,可能参与了PD的疾病过程.