外泌体包裹GDF15 siRNA靶向治疗肝癌的研究

目的 在外泌体表面表达肝癌靶向肽SP94,并将生长分化因子15(GDF15)的siRNA包裹至外泌体中,研究其对肝癌的治疗作用.方法 首先设计合成GDF15的siRNA,转染Hepa1-6和H22细胞作为实验组,无靶向的siRNA作为对照组,通过实时定量PCR、蛋白免疫印迹和流式细胞术验证GDF15 siRNA的功能.再构建一个靶向肝癌的SP94-Lamp2b-HA质粒,转染入HEK293T细胞后提取工程化外泌体SP94-外泌体,用SP94-外泌体包裹GDF15 siRNA作为SP94-siRNA-外泌体实验组,空载S P94-外泌体作为空载对照组,通过尾静脉注射法将两组外泌体导入小鼠体内,研究小鼠原位肝癌模型的治疗效果,并对小鼠的生存期进行观察.另外,将SP94-siRNA-外泌体尾静脉注射入健康小鼠体内,观察器官变化情况,对比血液生物化学和炎性因子指标差异.结果 成功合成GDF15 siRNA,在转染Hepa1-6和H22细胞后,GDF15的mRNA和蛋白水平表达明显降低(P<0.05).在对原位肝癌小鼠的治疗中,与对照组相比,实验组SP94-siRNA-外泌体明显抑制肿瘤的增长(P<0.05),同时延长小鼠的生存期.实验组与对照组小鼠器官、血液生物化学和炎性因子指标无明显差异(P>0.05),表明SP94-siRNA-外泌体对小鼠基本无毒副作用.结论 SP94-siRNA-外泌体可以精准靶向肝癌,并有效地抑制肝癌的生长.