Cre-miR171在柑橘响应干旱胁迫中的作用

干旱是影响柑橘生产的一个重要因素.为探究Cre-miR171在柑橘耐旱中的作用,本研究对其前体上游启动子顺式作用元件进行了分析,研究了其在柑橘组织及生长发育时期的表达特征,验证了Cre-miR171在柑橘中的靶基因,评价了干旱胁迫下Cre-miR171及其靶基因在根不同部位的表达模式,以及过表达Cre-miR171的拟南芥和柑橘的耐旱性.结果表明,Cre-miR171前体序列启动子区具有与应答及调控逆境胁迫相关的多种响应元件.在根发育的早期高表达,在侧根发生区的表达量高于根尖.通过生物信息分析及组织表达相关分析鉴定到了3个靶基因,CclSCL6,CclSCL22和CclSCL26,并利用烟草瞬时表达试验证实了这3个靶基因与Cre-miR171的靶向关系.在为期15 d的干旱胁迫处理中,Cre-miR171在侧根区和根尖的表达在处理的第10 d出现了明显的相反趋势,在根尖上调表达,在侧根区下调表达,3个靶基因的表达也呈现相应的变化.过表达Cre-miR171的拟南芥和柑橘对干旱的敏感性显著高于对照,过表达Cre-miR171的柑橘主根的伸长生长和侧根的发生受到了抑制.以上结果表明,Cre-miR171能影响柑橘根的伸长生长和侧根发生,负调控柑橘的耐旱性.