真武汤经Ito/Kv通路对心力衰竭心肌细胞电重构的影响

探讨真武汤通过瞬时外向钾电流(Ito)/电压门控钾(Kv)通路来调节电重构以治疗心力衰竭的可能作用机制.取 5只正常SD大鼠灌服真武汤颗粒剂制备含药血清,另取 7 只正常SD大鼠灌服等量蒸馏水制备空白血清,常规传代H9c2 心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用 24 h后,分别采取 2%、4%、8%含药血清,辛伐他汀(simvastatin,SIM)及氯化钡(BaCl2)干预细胞 24 h,设为对照组[N,10%空白血清+90%高糖培养基(DMEM-H)];模型组(M,AngⅡ+10%空白血清+90%DMEM-H);真武汤含药血清低剂量组(Z1,AngⅡ+真武汤 2%含药血清+8%空白血清+90%DMEM-H);真武汤含药血清中剂量组(Z2,AngⅡ+真武汤 4%含药血清组+6%空白血清+90%DMEM-H);真武汤含药血清高剂量组(Z3,AngⅡ+真武汤 8%含药血清组+2%空白血清+90%DMEM-H);诱导剂组(YD,AngⅡ+SIM+10%空白血清+90%DMEM-H);抑制剂组(YZ,AngⅡ+BaCl2+10%空白血清+90%DMEM-H).ELISA 检测各组细胞提取液中 ANP 水平,实时荧光定量 PCR 技术检测 ANP、Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3、DPP6、KChIP2 的mRNA相对表达水平,采用Western blot法检测Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3、DPP6、KChIP2 蛋白表达,全细胞膜片钳技术检测Ito.结果显示,低、中、高剂量真武汤均能有效降低心肌细胞表面积.与M组比较,Z1、Z2、Z3、YD组ANP含量及mRNA水平显著下降,Kv4.2、Kv4.3、DPP6、KChIP2 蛋白表达及mRNA水平升高,Kv1.4 蛋白表达及mRNA水平降低,以真武汤高剂量组效果最显著;与N组比较,真武汤组Ito 峰值电流、电流密度明显上升.表明真武汤可以通过改善 Kv1.4、Kv4.2、Kv4.3、KChIP2、DPP6 蛋白表达趋势及诱导Ito 调控电压门控钾通道,调节心肌结构重构和电重构,这可能是其治疗心力衰竭及相关心律失常的机制之一.