基于实验和网络药理学探讨丹知青娥方改善下尿路症状的作用和分子机制

[目的]明确丹知青娥方(DZQE)是否具有调节膀胱功能改善男性下尿路症状(LUTS)的潜在作用,并预测可能的靶点和通路.[方法]用膀胱灌流法检测DZQE对正常雄性Wistar大鼠排尿参数的影响;分离正常大鼠膀胱逼尿肌肌条,用肌条张力实验检测DZQE对膀胱逼尿肌舒缩的调节作用;在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和中医百科全书(ETCM)筛选DZQE中的活性成分和靶点信息;通过GeneCards和DisGeNET数据库获取LUTS疾病靶点;筛选DZQE与LUTS的共同作用靶点,并归属其蛋白质类型;通过Cytoscape_v3.7.1 软件构建中药-活性成分-作用靶点网络;通过富集分析数据库(DAVID)v6.8 对相关靶点进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析(KEGG)信号通路富集分析.[结果]DZQE能够降低雄鼠膀胱漏尿点压(DLPP)和最大排尿压(MVP);促进大鼠膀胱逼尿肌收缩,同时抑制氯化钾(KCl)诱导的肌条过度收缩,呈现双向调节效应.筛选得到DZQE中102个活性成分,共对应258个药物潜在靶点,LUTS疾病靶点246个,其中共同作用靶点47个,DZQE可能作用于LUTS的活性成分 59 个;GO富集分析涉及平滑肌收缩、血管收缩、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联、雌激素应答等生物过程;KEGG分析后得到包括磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKt)、甲状腺激素、钙离子、雌激素、肿瘤坏死因子(TNF)、ErbB、MAPK、转化生长因子β(TGF-β)信号通路等 88条信号通路.[结论]DZQE可以通过多条信号通路调节膀胱平滑肌舒缩,改善雄鼠下尿路症状.