毛壳素靶向Hsp90抑制食管鳞癌细胞Eca109生长的机制研究

目的:探讨毛壳素对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡的影响及潜在作用机制.方法:采用不同浓度毛壳素处理Eca109 细胞,CCK-8 法、3D肿瘤成球实验、克隆形成实验检测毛壳素对食管鳞癌细胞增殖活力的影响,流式细胞仪检测毛壳素对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响,划痕愈合实验和Transwell实验检测毛壳素对迁移、侵袭的影响.分子对接、细胞热位移实验验证毛壳素与Hsp90 的相互作用.蛋白免疫印迹法检测周期、凋亡、迁移侵袭及分子机制相关蛋白的表达变化.结果:毛壳素能显著抑制Eca109 细胞的增殖活性,抑制成球能力和集落形成能力(P<0.01).流式细胞仪检查结果显示,与对照组相比,毛壳素处理组G2/M期的比例明显增加(P<0.001),凋亡率显著增加(P<0.01).划痕愈合实验和Transwell实验结果表明,毛壳素处理组Eca109 细胞的迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.01).分子对接和细胞热位移实验显示毛壳素与Hsp90 具有较强的结合能力.Western blot结果显示,毛壳素处理细胞后,周期相关分子CDK1 表达下调,p-Histone H3 上调,凋亡相关蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-3 上调,迁移侵袭相关蛋白E-Cadherin上调,N-Cad-herin和Snail下调,Hsp90 客户蛋白p-EGFR、p-STAT3、p-AKT、p-ERK1/2 表达下降.结论:毛壳素可能通过靶向Hsp90 抑制其客户蛋白活性,从而抑制食管鳞癌细胞增殖.