不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白的免疫效果分析

为研究不同免疫增强剂对禽戊型肝炎病毒(aHEV)ORF2蛋白的免疫效果影响,研究通过大肠杆菌原核表达系统表达aHEV ORF2蛋白,纯化后与弗氏佐剂按1∶1等体积混合制备亚单位疫苗.将90只1日龄SPF雏鸡随机分成6组,每组15只.ORF2蛋白组单纯免疫YT-ORF2蛋白,ORF2蛋白+弗氏佐剂组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂,AB101组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB101,AB106组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB106,AB506组免疫YT-ORF2蛋白+弗氏佐剂+AB506,空白对照组免疫生理盐水,分别在21、28、42日龄三次免疫SPF鸡.采用ELISA和间接免疫荧光检测不同免疫组SPF鸡的aHEV抗体水平,通过流式细胞仪检测CD4+和CD8+ T淋巴细胞水平,荧光定量PCR检测IL-2、IL-4、IFN-γ 3种细胞因子表达情况,并测定体重和器官发育指数.结果显示:原核表达获得分子量为72 ku的ORF2蛋白,AB106组产生的抗体水平极显著高于其他各组(P<0.01),AB106和AB506免疫增强剂可引起CD4+和CD8+ T细胞比重显著增加并上调IL-2、IL-4、IFN-γ表达量(P<0.05),AB106组脾脏指数、法氏囊指数显著高于空白对照组、ORF2蛋白组和ORF2蛋白+弗氏佐剂组(P<0.05).研究表明含胸腺肽和TLR7激动剂的免疫增强剂可显著提高CD4+和CD8+ T细胞比重并上调与免疫相关的细胞因子表达量,其中且含胸腺肽的免疫增强剂诱导的aHEV抗体水平较高.