益肾化湿颗粒调节PI3K/Akt信号通路对糖尿病大鼠肾损伤的影响

目的 探究益肾化湿颗粒对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用,并初步探究作用机制.方法 复制糖尿病肾损伤大鼠模型,设立正常组、糖尿病肾损伤组、益肾化湿颗粒低、中、高剂量组、厄贝沙坦组(阳性对照),每组12只大鼠.益肾化湿颗粒各组每日灌胃0.15,0.30,0.60 g/kg益肾化湿颗粒;厄贝沙坦组每日灌胃0.02 g/kg厄贝沙坦,正常组、糖尿病肾损伤组灌胃等量蒸馏水,连续给药8 w后取材.采集尾静脉血检测血糖血脂水平;收集大鼠24 h尿液利用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平;获取肾组织,测定肾重指数;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织形态学变化;透射电镜观察肾组织超微结构变化;Tunel染色法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况;West-ern印迹检测大鼠肾组织中10号染色体上缺失的磷酸酯酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞癌(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3蛋白表达.结果 与正常组相比,糖尿病肾损伤大鼠血清空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低,BUN、Scr、24 h尿蛋白量显著升高,肾重、肾重指数显著升高,体重显著降低,肾组织损伤评分显著升高,细胞凋亡率显著升高,肾组织中PTEN蛋白表达显著降低,PI3K蛋白表达及Akt磷酸化水平显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax、caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05).与糖尿病肾损伤组相比,益肾化湿颗粒各组、厄贝沙坦组大鼠血清FBG、TG、TC水平显著降低,HDL-C水平显著升高,BUN、Scr、24h尿蛋白量显著降低,肾重、肾重指数显著降低,体重显著升高,肾组织损伤评分显著降低,细胞凋亡率显著降低,肾组织中PTEN蛋白表达显著升高,PI3K蛋白表达及Akt磷酸化水平显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、caspase-3蛋白表达显著降低(均P<0.05).结论 益肾化湿颗粒能够通过抑制PI3K/Akt信号通路活化,减轻糖尿病大鼠肾损伤、降低肾组织细胞凋亡,进而发挥对糖尿病大鼠肾功能的保护作用.