同种异体子宫内膜异位症大鼠模型用于GnRH激动剂类药物的药效评价研究

目的 用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响.方法 取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上,构建同种异体的子宫内膜异位症模型.3周后,测量异位内膜的长、宽、高,计算给药前异位内膜的体积V1.将进行假手术操作的大鼠设为假手术组,将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组(0.25 mg/kg)、GenSci006-1 组(0.125 mg/kg)和 GenSci006-2 组(0.25 mg/kg)共4组,每组大鼠16只.各组大鼠单次给予相应的药物,假手术组和模型组给予同等体积的溶剂.3周后,再次测量异位内膜,计算给药后异位内膜的体积V2和抑制率;通过比较脏器系数及病理切片的变化,判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响;ELISA法测定血清中雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P4)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平的变化;实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体(GnRH receptor,GnRHR)mRNA的表达水平.蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、ERβ和孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白的表达.结果 给药3周后发现,与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加(P＜0.05),而异位内膜的体积显著减小(P＜0.05).与假手术组相比,模型组子宫、卵巢脏器系数及子宫内膜厚度无明显变化(P＞0.05);与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低(P＜0.05).与假手术组相比,模型组血清中E2、P4、FSH、LH水平无明显变化(P＞0.05);与模型组相比,曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P4水平均显著降低(P＜0.05),而GenSci006-1组大鼠的血清LH水平明显升高(P＜0.05),但各组血清E2和FSH水平并无显著变化(P＞0.05).与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHR mRNA表达水平显著下调(P＜0.05);各组大鼠下丘脑组织中GnRHR mRNA表达及异位内膜组织中ERα、ERβ、PR蛋白表达水平无明显变化(P＞0.05).结论 大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型,而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E2水平均可作为检测药物疗效的指标.