La mesure de la couleur par spectrophotometrie constitue une approche simple, rapide, non destructive et relativement bon marche pour obtenir des donnees objectives a partir de specimens solides colores. Elle presente donc un potentiel dans l’optique de fournir des informations pertinentes pour l’etude forensique d’imitations et de contrefacons de medicaments. Plusieurs lots de medicaments vendus pour le traitement de la dysfonction erectile chez l’homme adulte ont ete etudies. Des specimens authentiques, des imitations et des contrefacons ont ete soumis a des mesures en refl exion au moyen d’un spectrophotometre de table. Le potentiel d’information vehicule par les resultats obtenus a ete considere en tenant compte de la repetabilite des mesures instrumentales, de l’homogeneite des specimens etudies et de leur vieillissement. La mesure de la couleur s’est averee etre une methode effi cace pour la discrimination entre specimens authentiques et contrefacons des medicaments etudies, comprenant le Sildenafi l®, le Tadalafi l® et le Vardenafi l® comme principe actif. Elle permet egalement d’evaluer la qualite generale du produit par le biais de l’homogeneite de sa couleur de surface, ainsi que de faire des liens entre des imitations fabriquees avec du materiel d’enrobage similaire. Combinee a la mesure d’autres caracteristiques physiques, notamment au niveau du blister, elle permet de dresser une structure hypothetique du marche des imitations des medicaments etudies.
Cet article presente trois methodes d’analyse des proteines intactes par spectrometrie de masse appliquees de maniere combinee au diagnostic des maladies de l’hemoglobine ou hemoglobinopathies. La premiere methode est basee sur l’analyse selective de couples ion precurseur – ion produit (« selected reaction monitoring » (SRM)) dans une trappe d’ions et utilise une technique particuliere d’activation des ions precurseurs appelee « electron transfer dissociation » (ETD). Elle permet l’identifi cation specifi que de variants de l’hemoglobine selectionnes pour leur prevalence et leur importance clinique. La seconde methode a ete developpee sur le meme instrument pour la quantifi cation de l’hemoglobine A2. Les ions precurseurs d’interet sont isoles puis detectes sans activation, permettant d’augmenter le rapport signal/bruit et d’atteindre un niveau de precision analytique compatible avec les exigences cliniques. La troisieme methode utilise un spectrometre de masse a haute resolution de type Qq-TOF avec activation ETD pour la caracterisation de variants rares de l’hemoglobine. Cette approche permet la localisation de la sequence mutee dans la chaine d’hemoglobine etudiee. Tous les developpements methodologiques presentes ont ete realises avec comme objectif que l’acquisition, l’analyse et l’interpretation des donnees puissent etre adaptees a un environnement clinique.
Cette revue decrit les nouveaux developpements analytiques dans le domaine du controle antidopage et se concentre plus particulierement sur la detection des petites molecules presentes sur la Liste des substances et methodes interdites de l'AMA. Les techniques de preparation de l'echantillon biologique, ainsi que les separations chromatographiques en phases gazeuse, liquide et supercritique sont decrites ainsi que leur couplage avec la spectrometrie de masse. Les avantages et inconvenients des differentes approches appliquees lors des etapes de criblage et d'analyse confirmatoire sont egalement discutes.
RESUME. L'interpretation des donnees issues de l'analyse par spectrometrie de masse tandem (MS 2) d'un melange complexe d'origine naturelle est une tâche ardue, generalement effectuee de maniere manuelle par un specialiste. Recemment, une approche bio-informatique innovante, nommee « reseaux moleculaires » (molecular networking), a ete developpee par un laboratoire americain de l'Universite de Californie de San Diego. Cette approche est capable d'organiser et de visualiser des donnees MS 2 sous la forme de carte de similarite spectrale, mettant en lumiere l'existence de groupes spectraux ainsi que leurs degres de similarite. Grâce a l'utilisation de reseaux moleculaires, des melanges complexes peuvent etre compares in silico et annotes, facilitant l'etude du metabolome d'organismes vivants. Avec la mise en ligne de la plateforme GNPS (http://gnps.ucsd.edu), cette approche est desormais accessible a l'ensemble de la communaute scientifi que. Cette fi che d'application presente le potentiel des reseaux moleculaires, au travers de deux exemples qui s'appuient sur l'analyse par chromatographie liquide couplee a la spectrometrie de masse tandem (LC-MS 2) d'extraits vegetaux du genre Euphorbia.
Examples of Stir Bar Sorptlve Extraction (SBSE) applications are given for sampling and analysis of contaminants that are regulated by the EU Water Framework Directive and emerging aquatic contaminants. A versatile applicability of SBSE as a screening tool for organic contaminants In surface waters, as In situ passive sampler In water and as a sample preparation technique in extraction and analysis of organic compounds In sediments, are shown. The stability of ana/ytes sorbed by SBSE Is also addressed.
Jerome Randon, Responsable du Master Analyse et Controle de l'Universite Claude Bernard Lyon 1 nous presente le cursus de ses etudiants qui auront, cette annee le choix d'une quatrieme option dediee a l'analyse industrielle. Cette creation repond a un besoin des entreprises, souvent florissantes, engagees dans une course a l'innovation et offrant une palette de debouches tres varies.
Une approche metabolomique est proposee pour l'analyse non-ciblee des metabolites de steroides anabolisants androgeniques presents dans l'urine. Une methode analytique, associant la chromatographie liquide a ultra-haute pression et un spectrometre de masse hybride quadripole a temps de vol, a ete utilisee pour l'analyse d'echantillons d'une etude clinique sur l'effet de la prise de testosterone. L'ensemble de donnees obtenu est caracterise par une structure a trois entrees (volontaires x temps x steroides mesures) a ete utilisee pour exploiter un profil de metabolites etendu permettant d'ameliorer la sensibilite des tests antidopage relatifs a l'administration de testosterone.
Afin d'ameliorer les connaissances du comportement a haute temperature des materiaux, le couplage de plusieurs techniques d'analyse physique in situ est une voie prometteuse. Dans ce but, des thermobalances ont ete equipees d'un appareil specifi que de mesure des signaux acoustiques emis par les echantillons dont la variation de masse est continument mesuree sous diverses atmospheres representatives de conditions industrielles. Les corrosions de surface a haute temperature sont a l'origine d'emission d'ondes acoustiques generees lors de la croissance ou de la fi ssuration de couches formees. Des mesures simultanees in situ des variations de masse et des signaux acoustiques apportent donc des informations sur ces mecanismes de corrosion haute temperature. L'application de cette methodologie aux mecanismes d'oxydation, reduction ou attaque par les atmospheres carbonees (cokage) est presentee dans ce document. Une perspective de ces etudes est de pouvoir etablir des referentiels pour une eventuelle utilisation de l'emission acoustique pour l'etude de la corrosion des equipements fonctionnant a haute temperature. // In order to improve the knowledge on the high temperature behaviour of materials, the coupling of in situ physical analysis is a promising way. For this purpose, thermobalances have been equipped with specific devices to measure the acoustic signals emitted by samples for which the mass variation is continuously recorded under simulated industrial atmospheres. The high temperature corrosion of materials surfaces generates acoustic emission signals associated to the growth or the cracking of the formed layers. In situ simultaneous measurements of the mass variation and the acoustic signals give information on the high temperature corrosion mechanisms involved. In this document, this methodology has been applied to the study of oxidation, reduction or attacks under carbon-rich atmosphere (coke deposition). These studies could lead to reference data for a possible application of acoustic emission for the corrosion monitoring of high temperature equipments.
Le couplage en ligne de l’electrophorese capillaire (CE) et de la spectrometrie de masse (MS) est une approche performante pour l’analyse de proteines sous forme intacte (i.e., sans digestion ou derivation). Les atouts de la CE, tels que la vitesse d’analyse, l’efficacite et la faible consommation de solvants et d’echantillons, sont ajoutes a ceux de la MS, selectivite, capacite d’identification, et sensibilite. De par sa large gamme de masses et son exactitude, le spectrometre de masse a temps de vol (TOF) est particulierement indique pour la detection des proteines multichargees par une source d’ionisation par electrospray (ESI). Dans ce contexte, le potentiel du couplage CE-ESI-TOF/MS a ete evalue pour l’analyse de proteines intactes dans differents domaines. Une premiere application concerne le domaine forensique et permet l’identification d’hormones de croissance dans des echantillons saisis par les douanes. Une seconde application s’inscrit dans le domaine de la lutte anti-dopage. Une methode d’analyse complete des transporteurs d’oxygene a base d’hemoglobine dans le plasma est mise au point et remplit les criteres antidopages en termes de selectivite et de sensibilite.
1 : Laboratoire de Chimie Analytique, CIRM, Universite de Liege, Avenue de l'Hopital 1, B36, Tour4 +2, 4000 Liege, Belgique 2 : Universite de Medecine et Pharmacie, “IULIU HATIEGANU” Cluj – Napoca, Rue Victor Babes 8, 400012 Cluj-Napoca, Roumanie 3 : Mithra Pharmaceuticals, Rue Saint-Georges 5, B-4000 Liege, Belgique 4 : Orailac Quality Solutions, Belgique 5 : UCB Pharma SA, R&D Clinical Pharmacometrics, Allee de la Recherche 60, B-1070 Bruxelles, Belgique # : Charge de recherche F.R.S.-FNRS
Ces dernieres annees, de nombreux supports et technologies innovants ont ete developpes en chromatographie liquide pour augmenter le debit d'analyse, tout en maintenant des performances similaires aux methodes conventionnelles. Parmi ces approches, on peut notamment citer l'utilisation de supports monolithiques, de hautes temperatures de phase mobile, de colonnes remplies de particules de taille inferieure a 2 μm ou de particules de moins de 3 μm superficiellement poreuses. Les instruments ont egalement subi des ameliorations telles que la reduction du volume extra-colonne et du volume de delai, l'augmentation des frequences d'acquisition des detecteurs, l'elevation de la perte de charge et de la temperature maximale admissibles, afin d'etre compatibles avec la chromatographie rapide. Cet article passe en revue l'utilisation de ces diverses approches dans le domaine pharmaceutique, ou un besoin croissant de techniques analytiques rapides est necessaire.
La menace d'accouchement premature et la rupture prematuree des membranes sont deux situations cliniques frequentes rencontrees quotidiennement en obstetrique, pour lesquelles une prise en charge optimale doit permettre d'eviter des complications graves pour le foetus et la future mere. Dans le cadre du diagnostic clinico-biologique de la menace d'accouchement premature, les marqueurs biologiques (principalement la fibronectine) ont fait la preuve de leur utilite mais l'echographie du col semble rendre un service equivalent avec une disponibilite immediate pour l'obstetricien. En revanche, l'utilisation de nouveaux marqueurs biologiques (Insulin-like Growth factor Binding Protein-1 ou Placen tal Alpha 1 -Microglobulin) lorsqu'elle est realisee au sein des laboratoires a permis de grandement ameliorer le diagnostic de la rupture prematuree des membranes, et ce principalement lors de formes cliniques frustres.
La decouverte des mutations V et II Leiden a ete l'occasion pour beaucoup de biologistes d'entrer dans le monde ' de la biologie moleculaire a partir de 1994. Diagnostic moleculaire le plus frequemment recherche avec la fibrose cystique et le X fragile, la recherche des mutations Leiden a connu une evolution rapide des techniques fonctionnelles de screening et des techniques moleculaires de mise en evidence. Les mecanismes expliquant le lien entre la presence d'une mutation ponctuelle Vou II Leiden et le risque clinique de developper un evenement thromboembolique ont ete explicites. Cette revue expose les aspects physiopathologiques de ces deux mutations, elle aborde les questions liees a l'indication des tests et aux strategies diagnostiques associant des methodes fonctionnelles et moleculaires.
L'analyseur KRYPTOR compact developpe par la societe CEZANNE SAS et commercialise par la societe B.R.A.H.M.S. est un automate d'immuno-analyse utilisant la technologie TRACE (Time Resolved Amplified Cryptate Emission) en phase homogene. Cet automate a fait l'objet d'une evaluation multi-centrique selon un protocole issu des recommandations du National Committee on Clinical Laboratory Standards (NCCLS) et du protocole de Validation des Techniques (VALTEC) de la Societe Francaise de Biologie Clinique (SFBC). Ces travaux avaient pour objectif d'evaluer d'une part, les performances analytiques du KRYPTOR compact par rapport a differents analyseurs de laboratoires, et d'autre part, sa praticabilite. Les resultats tres satisfaisants, tant sur le plan analytique qu'ergonomique, de cette etude permettent d'envisager l'utilisation du KRYPTOR compact dans les laboratoires d'urgence et de biologie specialisee.
