Конъюгаты Стрептокиназа-Полиэтиленгликоль С Повышенной Стабильностью И Сниженными Побочными Эффектами

Ковалентные конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 с различными степенями модификации аминогрупп белка получены вариацией времени инкубации стрептокиназы (СК) с активированным полиэтиленгликолем (M 2 и 5 кДа, ПЭГ2 и ПЭГ5); изучены их свойства в сравнении со свойствами свободной СК in vitro. Показано, что максимально стабильные в плазме и сохраняющие 80% исходной фибринолитической активности конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 образуются при степенях модификации аминогрупп белка 54 и 52% соответственно. При взаимодействии данных конъюгатов с плазминогеном в эквимолярных концентрациях образуются активаторные комплексы плазмина (Пл) Пл.-ПЭГ2 и Пл.-ПЭГ5, максимальная амидазная активность которых равна активности комплекса Пл с нативной СК. Найдено, что каталитическая эффективность активации плазминогена (kПг/KПг) комплексом Пл.-ПЭГ2 немного выше (2.84 мин-1 мкM-1), а комплексом Пл.-ПЭГ5 ниже (1.17 мин-1 мкM-1), чем немодифицированным комплексом Пл. (2.1 мин-1 мкM-1). Исследование кинетики лизиса сгустков из плазмы крови человека и истощение уровней плазминогена и фибриногена в плазме под действием равных доз свободной СК и указанных конъюгированных образцов СК показало, что конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 обладают высокой тромболитической активностью (89 и 72% от активности свободной СК соответственно) и вызывают в 3.5–4 раза меньшие побочные эффекты, чем свободная СК. Полученные нами конъюгаты СК-ПЭГ2 и СК-ПЭГ5 с повышенной стабильностью в плазме и низким уровнем побочных эффектов могут быть использованы в терапии тромботических заболеваний.