叶黄素对叔丁基过氧化氢诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响
Chinese Journal of Pathophysiology(2015)
摘要
目的:观察叶黄素对视网膜神经节细胞系( RGC-5)的保护作用,并对其机制进行初步探讨。方法:将RGC-5细胞随机分为:对照组、t-BHP组、t-BHP和叶黄素共同作用组、叶黄素组,培养24 h,MTT检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测caspase-3蛋白的活化情况;Western blot检测Bcl-2/Bax、cleaved caspase-3、JNK和c-Jun蛋白的变化。结果:MTT法和流式细胞检测结果显示叶黄素可对抗t-BHP诱导的RGC-5细胞凋亡;免疫荧光结果显示叶黄素可减少t-BHP诱导的caspase-3的活化;Western blot结果显示t-BHP处理后RGC-5细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase-3表达上调,JNK和c-Jun蛋白的磷酸化水平增加,叶黄素能部分逆转上述结果。结论:叶黄素能够对抗t-BHP诱导的RGC-5细胞凋亡而显示其保护作用,其机制是抑制Bax/Bcl-2表达及caspase-3蛋白活化,并降低JNK和c-Jun蛋白的磷酸化。
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