Пептидный Синтез, Катализируемый Субтилизином-72 В Органических Растворителях

Проведено сравнительное изучение растворимости, стабильности и активности нативного субтилизина-72 и его комплекса с SDS в ряде полярных органических растворителей. Показана возможность катализа образования пептидной связи субтилизином, суспендированным в ацетонитриле, и комплексом SDS-субтилизин, растворенным в этаноле и изопропаноле. С помощью SDS-субтилизина получены: трипептид Z-Ala-Ala-Leu-pNA, тетрапептиды общей формулы A-Ala-Ala-PpP,-В, где А = Z или Abz; Р, = Leu, Phe, Met, Trp, Ile, Tyr, Phe(N0 2), Glu(OCH 3), P', = Leu, Phe, Glu, Ala, Ile, Val, Arg; В = NH 2, pNA, Ded; пентапептиды Z-Ala-Ala-Leu-Ala-Ala-pNA и Z-Ala-Ala-Leu-Ala-Phe-pNA, гексапептид Abz-Val-Ala-Phe-Phe-Ala-Ala-Ded. Под действием SDS-субтилизина проведена олигомеризация трипептида H-Phe-Ala-Leu-OCH 3 в этаноле с получением 63% три- и 37% тетраолигомеров соответственно. Показано, что SDS-субтилизин является более эффективным катализатором, чем нативный фермент в виде суспензии.